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利休死后,本家的堺千家由长男千道安继承,道安没后断绝。
从利休的养子、女婿千少庵之子、千宗旦的系统分出三千家(表千家・里千家・武者小路千家)。此三家存续至现在。
* 川口素生『千利休101の谜』(PHP研究所、2009年) ISBN 4-569-67229-1
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1920年,柏乐文利用来自监理会、洛克菲勒基金及地方捐助的20万银元,拆除博习医院原有中式平房,兴建1幢3层半住院大楼和1幢2层门诊大楼,拥有100张床位。建筑工程于1922年春落成,是当时中国相当先进的一所西医医院,被美国外科专家评价为“如此医院全中国仅三、四处而已。”。
1927年春,柏乐文退休返回美国,同年12月14日逝世。他的骨灰被运回苏州,安葬于葑门外安乐园。
1939年,监理会与美以美会合并,改称基督教卫理公会,1941年,监理会中国传道区也改为中华基督教卫理公会的华东年议会,博习医院的隶属关系也随之发生改变。不久,太平洋战争爆发,美籍人员均被关押进集中营,医院停办。
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基于核酸内切酶的基因编辑系统是由一个分子“剪刀”(如Cpf1)和一个由DNA构成的引导序列组成的。由DNA构成的引导序列会引领分子“剪刀”与靶向序列的DNA结合,使得靶向序列被切除。
由于原核生物需要保护自己免受噬菌体的侵袭,现有一种猜想认为每种噬菌体都有对应的分子“剪刀”免疫系统,所以还有大量的这样的系统等待人们去发现。
Cas9需要2条RNA分子来做DNA的剪切,然而,Cpf1只需要1条。Cas9蛋白在切割DNA双链时,两条链上的切口在两链的相同位置上,所以留下的末端是平末端(非粘性末端)。Cpf1蛋白则不同,其在DNA两条链上的切割位点不在同一位置上,因此会产生粘性末端。由于粘性末端的缘故,在Cpf1酶切末端上插入新序列比Cas9的酶切末端上更容易。
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