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脱甲基化（Demethylation）是一种结果使得甲基（CH3）从一个分子上脱下的化学反应。最常见的脱甲基化方法是将氢原子置换掉甲基，结果也就是使得净损失一个碳原子与两个氢原子。

在生物化学系统中，脱甲基化的过程是被Demethylase催化进行的。这些酶氧化N-甲基，发生在组蛋白和某些形式的DNA中：

R2N-CH3 + O → R2N-H + CH2O

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