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方干,字雄飞,号玄英,睦州靑溪(今浙江淳安)人。
自幼好吟咏,深得徐凝器重,后入赘桐庐章八元家。一次不愼跌破嘴唇,人称之「缺唇先生」。毎见人连跪三拜,人呼「方三拜」。懿宗大中年间,参加考试落第,隐居绍兴鉴湖。
咸通年间,浙东廉访使王龟多次向朝廷推荐,因貌陋终不受用,一生不事功名,放怀山水,行吟自娱,“官无一寸禄,名传千万里”。性多讥戏,又喜欢吃鱼鲊。晚年与浙东观察使刘汉宏有往来,约卒于光启二年(886年),时年七十八。卒后其门生私谥“玄英先生”。昭宗光化三年(900年),经其学生韦庄奏请,追赠为进士出身。门人杨弇得其诗三百七十余篇,集成十卷,《全唐诗》录其诗六卷,《四库全书》收其诗八卷。
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递减PCR,亦称降落PCR(touchdown PCR)是一种PCR(聚合酶链式反应)方法,用来避免非特异性序列的扩增。PCR中引物的黏合温度(annealing temperature)决定了黏合的特异性,温度越高特异性越强,但过高则不能实现引物和模板的结合,而过低会产生大量非特异性产物。因此进行PCR时需要寻找合适的黏合温度。
递减PCR开始先设定一个比较高的黏合温度,每个循环黏合温度下降1℃,到一个较低温度以后每个循环的黏合温度保持不变直到结束。在刚下降到特异性结合可以进行的最高温度时,可以达到最高的特异性。这样在起初的几个循环中,特异性扩增序列可以相对非特异性序列多扩增若干倍,从而减轻非特异性扩增对结果的干扰。这种方法可用于省去多次试验最佳黏合温度的工作。
此外,递减PCR还可与简并引物(degenerate primer)结合使用,用来推出一段已知肽链的氨基酸序列所对应的DNA碱基序列。
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少孤苦,为太平天国军队所虏为兵,后降清加入左宗棠湘军,善用大刀,年未三十即积战功任浙江提督。
1864年六月,太平天国堵王黄文金护卫洪天贵福逃出天京,于浙江淳安遇黄少春所率湘军,黄文金身被十余刃阵亡。其后黄少春又领浙兵于1866年初平定太平军残部于广东。
光绪六年(1880年)清政府任命黄少春负责浙江防务,后在中法战争中奉命驰援广西。光绪二十年(1894年),调任长江水师提督,甲午战争战后任福建陆路提督,加太子太保衔。庚子事变时曾率军勤王,在河北获鹿一带抵御八国联军。
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