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永禄12年（1569年）武田信玄侵攻伊豆之际，担任韮山城的守备，并击退武田军。由于领地为相模国三浦郡三崎宝藏山等地理因素，而率领三浦水军。
在天正14年（1586年）丰臣秀吉平定九州后，北条氏规对内主张投降丰臣家，并作为当主北条氏直的使者数度上洛与秀吉会面交涉，但由于北条家内部主战派占了上风，北条氏规的努力斡旋并未无成效，丰臣秀吉为统一日本于天正18年（1590年）大举攻入关东。
此次战役中，北条氏规统率3640余兵马负责在居城韭山城驻守，但根本不是丰臣家4万大军的对手，最后在抵抗4个月以后，接受旧友德川家康的劝告开城投降，随后回到小田原城劝说北条氏政与姪儿北条氏直投降，于小田原城陷落后，随氏直一起被流放到高野山。
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