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一般情况下在在高压饱和蒸汽121摄氏度下处理15到20分钟即可达到灭菌效果，但考虑到使用的目的以及不同器材有不同厚度，因此在处理一般的感染性废弃物时若能达到操作温度摄氏121度以上，每平方英吋15磅以上之压力，加热时间为60分钟以上会更佳。通常可以利用各种不同的指示方式来确认灭菌成功与否，举例来说嗜热杆菌芽孢就是良好的检测生物指示剂，唯有经过成功灭菌手续后的嗜热杆菌芽孢才会失活而无法生长。
高压釜的基本原理和高压锅相似，都是通过加压提高水的沸点来达成高温。高压釜需要排去比热容较低的空气，以饱和水蒸汽取而代之，才能有效加热物体实现灭菌。饱和水蒸气在134°C三分钟即可完成灭菌，而一般空气即使是在160°C也需要两小时。高压釜按照排气原理可以分为：
除此之外还有较为简陋的高压釜，不设专门的排气装置，需要手动进行排气。这类高压釜和加了压力表的高压锅没有什么区别，一般叫做灭菌锅，在经济条件较差或者非医用的地方常有使用。
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