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使用直立电泳组合时，由上（负极）至下（正极）的主要组成分别为缓冲液（Tris-Glycine，pH 8.3）→样本溶液（pH 6.8）→堆积层（Tris-HCl，pH 6.8）→分离层（Tris-HCl，pH 8.8）→缓冲液（Tris-Glycine，pH 8.3）。
样本在堆叠层电泳的过程中，会被压成一个薄层，再以相同的起始点，进入分离层。
堆积层含有4-5%的丙烯酰胺，这样堆积层的孔径就相对较大和松散。这一层的目的是让样品在堆积层和分离层的界面浓缩到一个超薄的区域（1-100nm）。当施加电压时，由于蛋白质外包裹着SDS，便使蛋白向正极迁移，由于这层的pH是6.8，甘氨酸在这里呈两性离子状态存在，所以这一层的离子强度便很低，从而形成高电阻,最终形成 高电场力 ,从而使蛋白质的在堆集层的迁移速率高于分离层。另外由于这层的孔径大，所以对一般蛋白质的迁移速率不造成影响；
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建安二十四年（219年），刘备大将关羽率大军包围曹操大将曹仁于樊城，曹操派遣他随于禁、庞德救援曹仁。关羽水淹七军，庞德属下诸将董衡想要避水从平地逃到大堤之上，关羽派兵箭如雨下。董衡与董超想要归降关羽，庞德得知而将董超、董衡杀害。
小说《三国演义》描写庞德、于禁出兵援救曹仁。董衡对于禁说：“今将军提七枝重兵，去解樊城之厄，期在必胜，乃用庞德为先锋，岂不误事？”于禁问原因。董衡说：“庞德原是马超手下副将，不得已而降魏；今其故主在蜀，职居‘五虎上将’，其亲兄庞柔也在西川为官。今使他为先锋，是泼油救火也。将军何不启知魏王，别换一人去？”
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