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第一个抵抗方法是使用酶水解β-内酰胺环。通过生产β-内酰胺酶等酶,细菌可以解开抗生素中的β-内酰胺环,使得抗生素失效。这些酶的基因可能本身就在细菌的染色体上,也可能通过质粒交换而获得,例如新德里金属β-内酰胺酶(NDM-1)。其基因表现可能是在接触抗生素后开始的。
细菌生产β-内酰胺酶并不表示使用任何β-内醯胺抗生素均无效。有时β-内醯胺抗生素可以与β内酰胺酶抑制剂同时使用。不过在对付任何怀疑生产β-内酰胺酶的细菌时,在使用β-内醯胺抗生素前要仔细评估,尤其因为使用β-内醯胺抗生素可能导致细菌生产β-内酰胺酶。假如在治疗开始时使用β-内醯胺抗生素导致β-内酰胺酶的生产,这会使得此后使用其它β-内醯胺抗生素非常困难。
第二个抵抗方法是使用另一个青霉素结合蛋白。β-内酰胺与这些青霉素结合蛋白的结合不十分好,因此β-内酰胺对这样的细胞壁生产的破坏不很有效。抗药性金黄色葡萄球菌(MRSA)使用这个方式抵抗β-内醯胺抗生素。这个抵抗手段也全部排除使用β-内醯胺抗生素进行治疗的方法。
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