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1517年，她与普法尔茨选侯的弟弟腓特烈（即后来的普法尔茨选侯腓特烈二世）相爱，被她的弟弟当时的西班牙国王卡洛斯一世（即是其后的神圣罗马帝国皇帝查理五世）发现埃莉诺正在阅读腓特烈的情信，因而迫使腓特烈发誓未有与埃莉诺秘婚，并将腓特烈逐出王庭。埃莉诺只好于1517年与卡洛斯一世去西班牙。次年，他们的外祖父阿拉贡国王费尔南多二世驾崩，卡洛斯为顺利继位，与埃莉诺一同拜访被费尔南多以精神失常为由囚禁在托德西利亚斯王宫圣克拉拉修道院的母亲胡安娜女王，获得其授权成为共治国王卡洛斯一世。埃莉诺将母亲的王宫布置出家的感觉，但卡洛斯一世登基后没有释放母亲直到她于1555年去世。
卡洛斯一世为了防止葡萄牙帮助国内的叛逆势力，先提议埃莉诺与其表弟葡萄牙王位继承人约翰结婚，但是未能成事后却于1518年将埃莉诺嫁给丧偶的姨丈葡萄牙国王曼努埃尔一世。曼努埃尔一世曾先后与埃莉诺的母亲胡安娜的姊妹伊莎贝拉及玛丽亚结婚并生下众多儿女包括王位继承人约翰。
1518年7月16日，埃莉诺以18岁之龄嫁给快将50岁的曼努埃尔一世。他们生了两名儿女，王子卡洛斯（早夭）及公主玛丽亚。1521年12月13日，曼努埃尔一世因疫病逝世，埃莉诺22岁便成了寡妇。虽然成为太后，埃莉诺仍然回到西班牙王庭居住，但是她的妹妹却去葡萄牙嫁给埃莉诺的继子约翰三世。
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