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景和元年十一月二十九日（466年1月1日），与刘彧有联结寿寂之等人乘著机会成功将废帝杀死。刘休仁等人推举刘彧为帝，登上御坐，又于十二月癸亥（466年1月6日）以休仁为使持节、侍中、都督扬南徐二州诸军事、司徒、尚书令、扬州刺史。泰始元年十二月丙寅（466年1月9日），刘彧正式即皇帝位，是为宋明帝。不久休仁因中护军刘道隆曾经在废帝指示下奸污了休仁生母杨修仪，上表辞让官职，表示不肯与刘道隆同朝，最后明帝为他赐死了刘道隆。明帝虽然即位，但另一方面，本已起兵反前废帝的江州刺史刘子勋在邓琬等人主导下拒绝明帝任命，抗拒其建康政权，而国内多个地方都支持刘子勋,形势对明帝相当不利。泰始二年正月甲午（466年2月6日），刘休仁被任命为都督征讨诸军事，率军南讨刘子勋。不久加领太子太傅，进攻刘子勋的诸军都由休仁总统，因战况对各军进行支援。正月七日（2月7日），邓琬等人在江州奉刘子勋为帝。刘休仁出屯虎槛，三月殷孝祖攻赭圻败死后，派遣宁朔将军江方兴、龙骧将军刘灵遗各领三千人续攻赭圻，击败抵御的陶亮，逼其后撤，仅由薛常宝守赭圻。四月辛酉（5月4日），沈攸之攻下赭圻，休仁随后进驻该城。休仁在军中抚恤将士，并关怀伤兵和阵亡者，十万大军因而都团结一致，并无异心。七月，休仁与袁𫖮所率的部众在浓湖相持已久，休仁在沈攸之及吴喜等人建议下听从张兴世冒险率数千人直取钱溪，阻截敌方粮道的策略。最终成功瓦解袁𫖮军，并于八月己卯（9月19日）攻败袁𫖮大营。邓琬失援无计，为张悦所杀并被献首休仁，沈攸之及后攻下寻阳，杀刘子勋。九月庚子（10月10日），休仁至寻阳，分命诸军到荆江郢雍湘各地平定子勋余众。徐州刺史薛安都在寻阳政权覆亡后仍然拒降，休仁遂都督北讨诸军事；刘休祐改任荆州刺史后，仁休又代其督西讨诸军事，负责讨伐豫州刺史殷琰所据寿阳。至其年十二月，薛安都以所领降于北魏，而刘勔就攻克寿阳。
另一方面，刘子勋等王虽被杀，但曾支持刘子勋的松滋侯刘子房获赦，与永嘉王刘子仁、始安王刘子真等几位较年幼的孝武帝诸王尚在世，休仁认为他们都是祸患，劝明帝杀害他们，最后他们都于泰始二年十月乙卯（466年10月25日）被赐死，令孝武帝诸子死尽。
宋明帝和休仁分别为宋文帝的第十一及十二子，年龄较接近，又有文学典籍的共同爱好，故一向都很友好。前废帝在位期间，明帝更屡因休仁而得以活命，至废帝死，休仁不但推明帝为主，助其登位，亦统兵助其讨平四方。休仁立下如此功勋，本亦得明帝重用，但当时朝野众人都交结休仁，反而令明帝对这位弟弟有所不满。休仁自己亦有所察觉，于是在泰始五年（469年）冬季求解扬州刺史，并得答允。泰始六年（470年），休仁又辞让太尉，领司徒的官职。不过，面对明帝对宗室渐增的猜忌和杀戮，休仁也很不安心，泰始七年（471年）刘休祐被杀一事更令休仁极度担忧恐惧。就在此年，明帝病重，正担心休仁在内诸弟会威胁太子刘昱的帝位；而杨运长亦怕明帝死后，由休仁辅政令自己无法获得权力，于是也赞同明帝诛除休仁之计划。而明帝患病，朝廷内外人士都认为休仁必定当权，主书以下官员都到东府巴结休仁亲信，当值无法出去的就十分恐惧。明帝见此就决定实行计划了，在泰始七年五月戊午（471年6月4日）召见了休仁，说：「夕可停尚书下省宿，明可早来。」而就在当晚，明帝就命人带毒药到尚书下省赐死休仁，对外宣称其谋逆事败，惧罪自裁。休仁死时对使者骂道：「上有天下，谁之功也。孝武以诛子孙而至于灭，今复遵覆车，枉杀兄弟，奈何忠臣抱此冤滥！我大宋之业，其能久乎。」享年二十九岁。
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核苷酸转移酶（nucleotidyl transferase）是将核苷酸从一物质转移至另一物质的酶。包括末端核苷酸转移酶，DNA聚合酶，RNA聚合酶。
末端核苷酸转移酶（terminal nucleotidyl transferase）
这是一种在反应混合物中有任何碱基存在时能使DNA链在3′—OH端延伸的酶。可用于遗传载体的构建以产生同聚物粘性尾巴，以便达到将过客DNA拼接在质粒上的目的过客DNA和质粒分别有如聚腺苷酸和聚胸苷酸的互补碱基，因而易于退火并连接在一起，末端核苷酸转移酶在成年骨髓细胞中也表达，并产生免疫球蛋白的多样性。
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